“一票否決”,品種審定的“鐵門檻”讓水稻種企對如何提高稻瘟病抗性格外關(guān)注。
然而,篩選抗稻瘟病基因,受到環(huán)境條件的限制。雖然水稻從抽穗到成熟,都易發(fā)稻瘟病,但要發(fā)病,易感品種和低溫連陰天缺一不可,因此在自然種植條件下,稻瘟病并不會年年重發(fā),要驗證材料的抗病性,往往需要人工接種病菌,工作量很大,成本也很高。
同時,引起稻瘟病的生理小種又是不斷變化的。就像流感病毒一樣,前兩年有效的流感疫苗今年就可能不管用了,所以選育抗稻瘟病的品種就如同和病菌變種進(jìn)行一場你追我趕的“持久性賽跑”。
有沒有一種辦法,能夠加快篩選速度,獲得市場所需的育種材料來定向改良品種呢?答案就是分子育種。為什么是分子育種?分子育種是怎樣加快篩選速度的?為了尋找問題的答案,記者來到了我國兩大農(nóng)作物分子育種平臺之一的華智水稻生物技術(shù)有限公司。
什么是分子育種?
——分子育種和常規(guī)育種就像西醫(yī)和中醫(yī),必須中西醫(yī)結(jié)合,才能取得高效益的理想效果
要知道分子育種為什么能幫助育種家跑得更快,首先需要了解什么是分子育種。
“如果說常規(guī)育種是看中醫(yī)、看表型,分子育種就類似西醫(yī)拍的一張張X光片,看品種內(nèi)部的各種基因型。”華智總經(jīng)理張健解釋說,有經(jīng)驗的老中醫(yī)拍拍背,可以憑經(jīng)驗猜出來肺部有沒有鈣點,但沒有百分之百的把握;分子育種技術(shù)類似能給醫(yī)生提供一個X光片,有沒有鈣點一目了然。當(dāng)然,分子育種也有誤差,但這種誤差跟沒有X光片時的判斷相比,精準(zhǔn)度高很多。
在張健看來,常規(guī)育種憑經(jīng)驗選育的過程就像一個“黑匣子”,肉眼只能區(qū)分抗病和感病,并不知道種子所具有的基因型是什么,更看不出抗病材料是雜合抗病還是純合抗病,而純合抗病材料才是育種家能夠利用的育種材料。分子育種能夠幫助育種家打開并解讀這只“黑匣子”,區(qū)分哪些是純合抗病材料,哪些是雜合抗病材料,利用純合抗病材料來加快育種進(jìn)程。
打開“黑匣子”,對育種效率與效益的提升主要體現(xiàn)在兩個方面。一是縮短育種時間。用常規(guī)育種手段定向改良一個農(nóng)藝性狀,需要回交6代才能得到理想的植株,一般需要5年~6年時間,而利用分子育種技術(shù),通過早期的基因型選擇,只需要3年左右,育種時間可以縮短一半。二是降低田間測試材料數(shù)量。假設(shè)有2個抗病材料,傳統(tǒng)育種方法需要足夠大的回交群體才可能獲得想要的材料,但分子育種技術(shù)可以通過基因型分型篩選,先把含有抗病基因的材料篩選出來,這樣就可以節(jié)省很多耕地。
“分子育種只需要一片水稻葉子,就能在基因型水平上診斷這種材料抗病不抗病,是純合抗病還是雜合抗病,但選擇的材料好不好,最終還是要到大田里看效果。”張健說,分子育種和常規(guī)育種一樣,都是一種技術(shù)手段,分子育種要用得好,取得好效果,必須和其他技術(shù)手段結(jié)合起來。分子標(biāo)記、生物信息、種質(zhì)創(chuàng)新、大田測試就像一張桌子的四條腿,多功能研發(fā)部門綜合在一起才能形成高效的分子育種大平臺。
隨著種植方式的轉(zhuǎn)變和消費水平的提高,水稻育種的目標(biāo)正在從單純的高產(chǎn)向高產(chǎn)穩(wěn)產(chǎn)、多抗廣適、品質(zhì)優(yōu)良、資源節(jié)約、環(huán)境友好、高效益等多重目標(biāo)轉(zhuǎn)變。“沒有最好的品種,只有最適合的品種。”張健說,育種就是要根據(jù)不同區(qū)域的水土光溫條件,篩選出最優(yōu)的基因組合,而分子育種能夠快速鎖定并聚合高產(chǎn)、多抗、口感好等優(yōu)良性狀的相關(guān)基因,既能幫育種家快速培養(yǎng)出“三好生”,也可以幫育種家培養(yǎng)更多適合不同區(qū)域的“特長生”。
“X光片”如何“拍”出?
——水稻的12對染色體就像12條高速公路,分子標(biāo)記就像設(shè)在高速公路上的路標(biāo)
華智承擔(dān)著建設(shè)農(nóng)業(yè)部國家水稻分子育種大平臺的重任。進(jìn)入華智第一個實驗室,在10多平方米的空間里,3臺巨大的黑色儀器呈“L”型擺開。“這是剛到位的道格拉斯陣列式分析卷帶(DouglasArrayTape)高通量SNP檢測平臺,目前是全球通量最高的基因分型平臺。”張健介紹說。
什么是通量?高通量意味著什么?“通量表示物質(zhì)分子移動量的大小,通量越高則單位時間內(nèi)完成的測試量越大。”張健解釋說,“只有通量上去了,研發(fā)成本才能降下來。”
據(jù)了解,人工操作,一天一個人最多能做幾百個SNP測試,而用這套設(shè)備,每天可以做23萬個SNP測試,相當(dāng)于2400臺普通96孔的PCR儀同時開動。目前,設(shè)備已經(jīng)調(diào)試完畢,為了盡快投入商業(yè)化使用,華智正加緊開發(fā)水稻全基因組分子標(biāo)記,今年的目標(biāo)是做出2000個分子標(biāo)記來。
什么是分子標(biāo)記?分子標(biāo)記有什么用?“分子標(biāo)記是可遺傳、可檢測的DNA序列,相當(dāng)于高速公路的路標(biāo)。”張健解釋道,如果把一條染色體比作一條高速公路,基因測序相當(dāng)于建高速公路,分子標(biāo)記就像是在高速公路上設(shè)路標(biāo)。分子標(biāo)記越多,路標(biāo)越精確,定位的精度也越高。有了大量的路標(biāo),就可以像GPS一樣精準(zhǔn)定位,快速鎖定要找的基因。
水稻有12條染色體,每一條染色體上有大量DNA,但并不是每個DNA都能成為標(biāo)記,分子標(biāo)記要發(fā)揮作用,關(guān)鍵在于找到那些通過實驗室與大田驗證,與高產(chǎn)、抗病或是抗倒伏直接相關(guān)的DNA序列,并把這些DNA分子標(biāo)記開發(fā)出來。
標(biāo)記的方式很重要。“分子標(biāo)記需要檢測手段簡單、快速、容易自動化,同時成本低、重復(fù)性好。”張健告訴記者,單個核苷酸的改變,就能體現(xiàn)出DNA序列的變化,因此單核苷酸多態(tài)性(SNP)檢測是目前最準(zhǔn)確、最快速也最適于自動化操作的分子標(biāo)記手段。
分子標(biāo)記一旦驗證完畢,對相應(yīng)基因的搜索就變得如探囊中之物一般便利。“利用道格拉斯高通量SNP檢測設(shè)備,2天~3天就能得出精確的檢測結(jié)果。”張健給記者展示了一組品種純度和真實性鑒定的結(jié)果,由于單個SNP被開發(fā)成能用熒光檢測的PCR產(chǎn)物,檢測結(jié)果在電腦屏幕上呈現(xiàn)出不同的顏色——基因型相同的顏色相同,基因型不同的顏色不同。是不是一個品種,品種純度高不高,就像“X光片”一樣一目了然。
分子育種平臺改變什么?
——種業(yè)研發(fā)缺乏轉(zhuǎn)化的環(huán)節(jié),分子育種平臺就是要將“沉睡”的資源喚醒盤活
目前,SNP分子標(biāo)記等分子育種技術(shù)已成為跨國種業(yè)巨頭加快培育新品種的一種利器。孟山都、杜邦先鋒均有多套道格拉斯高通量SNP檢測設(shè)備。如果國內(nèi)種業(yè)僅用常規(guī)育種手段來應(yīng)對挑戰(zhàn),則無異于坐著牛車和汽車賽跑。
然而,一套道格拉斯高通量SNP檢測平臺,即使不算耗材和人工成本,也需要上千萬元,對于每年研發(fā)投入至多幾千萬元的國內(nèi)種企來說,單槍匹馬做分子育種既不實際也不實惠。為了解決單個企業(yè)做分子育種既“吃不起”也“吃不飽”的兩難困境,實現(xiàn)“同乘一輛車,各買一張票”,在農(nóng)業(yè)部推動下,華智和中玉金標(biāo)記兩大分子育種平臺應(yīng)運(yùn)而生。
“和普通的種業(yè)企業(yè)不同,我們不會把研發(fā)的種子直接賣給農(nóng)民。”張健說,“兩大分子育種平臺定位于專業(yè)化高科技種業(yè)服務(wù)公司,主要任務(wù)就是為商業(yè)化育種單位提供分子育種服務(wù)。”
他介紹說,科研院所的研究人員克隆一個基因就可以發(fā)表論文,但要將此基因應(yīng)用到育種生產(chǎn)上,還缺乏一個技術(shù)開發(fā)與成果轉(zhuǎn)化的環(huán)節(jié),分子育種平臺就是要為基礎(chǔ)理論成果向產(chǎn)業(yè)化轉(zhuǎn)化鋪路搭橋,因此不僅要在實驗室和大田條件下驗證基因的優(yōu)劣,而且要將優(yōu)良基因?qū)氲缴虡I(yè)化育種材料中,創(chuàng)造新的種質(zhì)資源,幫助“沉睡”的基因或資源變成商業(yè)化育種中真正有價值的材料。
在國外開發(fā)1個轉(zhuǎn)基因農(nóng)產(chǎn)品需要1.36億美元,其中早期研發(fā)的投入約占23%,中期驗證占51%,后期推廣、法規(guī)等方面投入占26%左右,中間驗證及產(chǎn)業(yè)化開發(fā)的費用要比早期研發(fā)高很多。而在國內(nèi),分子育種技術(shù)的研究還停留在早期概念階段,由于缺少成果驗證與產(chǎn)業(yè)化轉(zhuǎn)化環(huán)節(jié),不少基因材料只能停留在實驗室的抽屜里,這也導(dǎo)致種質(zhì)創(chuàng)新停滯不前,進(jìn)而制約了突破性大品種的選育。
解決科研成果轉(zhuǎn)化難,必須理順分工。“科研院所是上游,提供基因材料;分子育種平臺是中游,專注技術(shù)的集成和開發(fā);種業(yè)企業(yè)是下游,開展商業(yè)化育種和推廣。”張健說,科研院所的研究人員發(fā)現(xiàn)了一個抗病基因,但只有一個抗病基因的材料不能滿足實際生產(chǎn)需要,這就需要對不同抗原、不同抗性位點的材料進(jìn)行驗證、集成和資源創(chuàng)新,然后將多抗的材料提供給下游公司。
張健認(rèn)為,專業(yè)化種業(yè)技術(shù)服務(wù)公司的壯大,將從根本上改變種業(yè)知識產(chǎn)權(quán)交易的游戲規(guī)則——利用DNA指紋圖譜給每個品種建立“身份證”,利用商業(yè)化合同明確規(guī)范產(chǎn)業(yè)鏈利益的分成機(jī)制,能有效遏制“偷材料”等市場亂象發(fā)生。“市場的整體運(yùn)作規(guī)范了,就能夠促進(jìn)種業(yè)向更好的方向發(fā)展,農(nóng)民就能用上更好的品種。”他說。