茶葉檢驗之一。檢測因防治病蟲害施藥或其他原因則殘存于茶葉中的農(nóng)藥及其有毒代謝產(chǎn)物的技術(shù)措施。茶葉中農(nóng)藥最高殘留限量,是根據(jù)某一農(nóng)藥的每人(平均體重50~70kg)每天允許攝入量、普查所得的實際殘留量(異常值除外)以及每人每天茶葉飲用量等因子計算出允許限量,再乘以一定的安全系數(shù)后訂出的。農(nóng)藥殘留量用ppm作為計算單位,不少國家對此訂有相應的限量標準和管理條例。
檢驗方法有一次檢測法和單一農(nóng)藥檢測法之分,前者又稱一步法,即一次分析可檢測出多種殘留農(nóng)藥,后者以茶葉中某一特定農(nóng)藥作為檢測對象。測定方法與步驟如下:
茶樣制備 有茶葉法和茶湯法兩種。茶葉法是將樣品磨碎通過20目篩網(wǎng),裝入玻璃瓶內(nèi)備用。茶湯法是取樣4~6g,加沸水量是茶樣量的60倍,浸泡5分鐘,過濾后備用。
抽提方法 抽提溶劑有正己烷、石油醚、二氯甲烷、氯仿、乙酸乙酯、丙酮、甲醇、乙腈等。抽提方法有如下5種:
①搗碎法:在組織搗碎機中,高速搗碎2~3分鐘,如乳化,則可用離心分離或其他方法破乳過濾,濾渣再抽提一次,合并濾液定容。
②振蕩法:茶樣加溶劑及一定量的酶制劑或甲酸,在振蕩一定時間后,過濾定容。
③脂肪抽提法:樣品放入抽提器中,脂肪瓶內(nèi)加入一定量的溶劑,回流抽提。
④浸漬法:將磨碎茶樣加一定溶劑,在密閉容器內(nèi)浸漬過夜,第二天過濾定容。
⑤液液分配法:茶葉浸出液在分液漏斗中,加入正己烷,液液分配,將浸出液中的農(nóng)藥轉(zhuǎn)移到正己烷中。
純化:將抽提液中的農(nóng)藥與茶葉成分分離開,除去大部分干擾物質(zhì),方法有三種:
①液液分配法:在分液漏斗中,利用農(nóng)藥的兩種互不混溶的溶劑中分配系數(shù)的差異,將農(nóng)藥由一種溶劑轉(zhuǎn)到另一種溶劑中,這樣就達到初步純化的目的。
②柱層析法:常用層析柱有常規(guī)層析柱和微型層析柱兩種。所用淋洗劑,有時是單一溶劑,如正已烷、苯、二氯甲烷、氯仿等,但多數(shù)是按一定比例配成的極性不同的混合淋洗劑。吸附劑,常用的有弗洛里硅土、硅藻土545/氧化鎂、酸性硅藻土、活性碳柱、硅膠柱、硅膠柱、纖維素柱、凝膠滲透柱等純化。 ③酸化法:適用于對濃硫酸穩(wěn)定的有機氯農(nóng)藥測定。在分液漏斗中加抽提液溶積十分之一的濃硫酸充分振搖,使抽提液中的非農(nóng)藥雜質(zhì)酸化。
分析:純化液中,某些農(nóng)藥經(jīng)色譜或其它方法進行測定,最常用的是氣液色譜法和薄層層析法兩種。氣液色譜法,一般采用電子捕獲檢測器、氮磷檢測器或火焰光度檢測器進行檢測。薄層層析法,用氧化鋁、硅膠作吸附劑,用粘合劑涂在薄板玻璃上,活化后,將純化液濃縮,點在其上,用不同極性的溶劑使其展開,分離定量。其他尚有高效液相色譜法、高效薄層分析法等。
定性和宣量:①定性:可采用氣液色譜法,用不同極性色譜柱,對照標準農(nóng)藥保留時間定性。也可用薄層層析法或其他化學衍生法進一步驗證。②定量:用氣液色譜分析測出的某一農(nóng)藥的峰面積和峰高,與已知濃度的標準農(nóng)藥面積、峰高相對照定量,具體采用方法,有外標法和內(nèi)標法兩種。薄層層析定量,則要測出樣品中農(nóng)藥斑點面積,對照已知濃度標準農(nóng)藥斑點面積,計算出樣品中的農(nóng)藥濃度。峰面積、峰高、斑點面積、保留時間、比移值,可用手工方法測出,也可用微型電腦積分儀、薄層層析掃描儀測定。
檢驗方法有一次檢測法和單一農(nóng)藥檢測法之分,前者又稱一步法,即一次分析可檢測出多種殘留農(nóng)藥,后者以茶葉中某一特定農(nóng)藥作為檢測對象。測定方法與步驟如下:
茶樣制備 有茶葉法和茶湯法兩種。茶葉法是將樣品磨碎通過20目篩網(wǎng),裝入玻璃瓶內(nèi)備用。茶湯法是取樣4~6g,加沸水量是茶樣量的60倍,浸泡5分鐘,過濾后備用。
抽提方法 抽提溶劑有正己烷、石油醚、二氯甲烷、氯仿、乙酸乙酯、丙酮、甲醇、乙腈等。抽提方法有如下5種:
①搗碎法:在組織搗碎機中,高速搗碎2~3分鐘,如乳化,則可用離心分離或其他方法破乳過濾,濾渣再抽提一次,合并濾液定容。
②振蕩法:茶樣加溶劑及一定量的酶制劑或甲酸,在振蕩一定時間后,過濾定容。
③脂肪抽提法:樣品放入抽提器中,脂肪瓶內(nèi)加入一定量的溶劑,回流抽提。
④浸漬法:將磨碎茶樣加一定溶劑,在密閉容器內(nèi)浸漬過夜,第二天過濾定容。
⑤液液分配法:茶葉浸出液在分液漏斗中,加入正己烷,液液分配,將浸出液中的農(nóng)藥轉(zhuǎn)移到正己烷中。
純化:將抽提液中的農(nóng)藥與茶葉成分分離開,除去大部分干擾物質(zhì),方法有三種:
①液液分配法:在分液漏斗中,利用農(nóng)藥的兩種互不混溶的溶劑中分配系數(shù)的差異,將農(nóng)藥由一種溶劑轉(zhuǎn)到另一種溶劑中,這樣就達到初步純化的目的。
②柱層析法:常用層析柱有常規(guī)層析柱和微型層析柱兩種。所用淋洗劑,有時是單一溶劑,如正已烷、苯、二氯甲烷、氯仿等,但多數(shù)是按一定比例配成的極性不同的混合淋洗劑。吸附劑,常用的有弗洛里硅土、硅藻土545/氧化鎂、酸性硅藻土、活性碳柱、硅膠柱、硅膠柱、纖維素柱、凝膠滲透柱等純化。 ③酸化法:適用于對濃硫酸穩(wěn)定的有機氯農(nóng)藥測定。在分液漏斗中加抽提液溶積十分之一的濃硫酸充分振搖,使抽提液中的非農(nóng)藥雜質(zhì)酸化。
分析:純化液中,某些農(nóng)藥經(jīng)色譜或其它方法進行測定,最常用的是氣液色譜法和薄層層析法兩種。氣液色譜法,一般采用電子捕獲檢測器、氮磷檢測器或火焰光度檢測器進行檢測。薄層層析法,用氧化鋁、硅膠作吸附劑,用粘合劑涂在薄板玻璃上,活化后,將純化液濃縮,點在其上,用不同極性的溶劑使其展開,分離定量。其他尚有高效液相色譜法、高效薄層分析法等。
定性和宣量:①定性:可采用氣液色譜法,用不同極性色譜柱,對照標準農(nóng)藥保留時間定性。也可用薄層層析法或其他化學衍生法進一步驗證。②定量:用氣液色譜分析測出的某一農(nóng)藥的峰面積和峰高,與已知濃度的標準農(nóng)藥面積、峰高相對照定量,具體采用方法,有外標法和內(nèi)標法兩種。薄層層析定量,則要測出樣品中農(nóng)藥斑點面積,對照已知濃度標準農(nóng)藥斑點面積,計算出樣品中的農(nóng)藥濃度。峰面積、峰高、斑點面積、保留時間、比移值,可用手工方法測出,也可用微型電腦積分儀、薄層層析掃描儀測定。