白色念珠菌(Candidaalbicans)作為條件性致病菌可正常存在于人畜口腔粘膜、胃腸道、肛門、陰道、皮膚等部位,一般不致病,但當(dāng)機體營養(yǎng)不良、維生素缺乏,長期使用抗菌藥物時,白色念珠菌感染機率增加,嚴(yán)重者可導(dǎo)致其它臟器感染發(fā)病甚至死亡。動物源白色念珠菌的單獨感染較少發(fā)生,一般都是混合感染,因其危害性不大,一般不易引起養(yǎng)殖業(yè)和獸醫(yī)工作者的重視。僅有個別養(yǎng)殖場飼養(yǎng)的肉種鴿、肉雞等,發(fā)生白色念珠菌感染的報道,但沒有造成經(jīng)濟損失。我室在鑒定長春市雙陽某鹿場一批病料時,從中分離到一株致病性白色念珠菌,現(xiàn)報告如下。
1 發(fā)病情況及病料采集
長春市某鹿場,約6.1%(8/131)發(fā)生程度不同的腹瀉,經(jīng)本場獸醫(yī)臨床指導(dǎo)用藥(氟苯尼考注射劑+退熱神針+復(fù)合維生素)部分好轉(zhuǎn)并痊愈,剩余3只頑固性腹瀉不止,患鹿精神沉郁,被毛凌亂,瘦弱,明顯營養(yǎng)不良。體溫40~41.5℃。肛門周圍污穢,糞便呈豆腐渣樣,內(nèi)含小氣泡。棉拭子取肛門污物及糞便。
2 實驗室檢查
2.1 涂片染色鏡檢
將病料經(jīng)生理鹽水處理后革蘭氏染色后鏡檢??梢姶蟛糠譃楦锾m氏染色陽性,著色不均勻,具有成群的芽生孢子和假菌絲,出芽細胞卵圓形,似酵母細胞樣。還有少量革蘭氏陰性菌,紅色短小桿狀。
2.2 病原分離培養(yǎng)
將病料經(jīng)生理鹽水處理后,直接劃線接種于沙氏瓊脂培養(yǎng)基平板、玉米粉吐溫瓊脂培養(yǎng)基平板及BTB平板上進行培養(yǎng)。然后根據(jù)菌落形態(tài)不同挑單菌落純化,結(jié)果在沙氏瓊脂培養(yǎng)基上,經(jīng)37℃培養(yǎng)48h的菌落為奶油,色酵母樣,圓形、邊緣整齊、中央凸起,濕潤、光滑。取該菌落中的培養(yǎng)物經(jīng)革蘭氏染色鏡檢,可見有成群的芽生孢子及假菌絲。在玉米粉吐溫瓊脂培養(yǎng)上經(jīng)37℃培養(yǎng)48h后,挑取菌落經(jīng)革蘭氏染色鏡檢,可見真菌絲、假菌絲、芽生孢子。在BTB培養(yǎng)基上,發(fā)酵葡萄糖后使綠色平板變成黃色,形成圓形、邊緣整齊的小菌落。
2.3 生化試驗
將經(jīng)過在沙氏瓊脂培養(yǎng)基平板及玉米粉吐溫瓊脂培養(yǎng)基平板純培養(yǎng)的菌液,用接種環(huán)接種于葡萄糖、麥芽糖、乳糖、半乳糖、蔗糖、果糖,甘露醇、山梨醇,經(jīng)37℃培養(yǎng)24h。結(jié)果顯示,該菌可利用葡萄糖、麥芽糖、果糖,產(chǎn)酸產(chǎn)氣,利用蔗糖、半乳糖,產(chǎn)酸不產(chǎn)氣,不利用乳糖、甘露醇、山梨醇。在BTB培養(yǎng)基.卜生長的小菌落未做生化試驗。
2.4 動物試驗
取小鼠4只,分成兩組,實驗組2只,將24h內(nèi)培養(yǎng)的菌液進行頸部皮下接種,對照組2只腹腔注射生理鹽水。實驗鼠在3h后接種部位有炎癥反應(yīng);5h后接種部位出現(xiàn)紅腫;7h后紅腫明顯加重。試驗鼠精神沉郁,伴有輕度腹瀉。對照鼠無異常反應(yīng)。第5天將兔致死。剖開膿腫部位,可見膿腫液粘稠狀。取膿腫液涂片經(jīng)革蘭氏染色鏡檢后觀察,發(fā)現(xiàn)病原形態(tài)同前。剖檢死兔,可見腎臟和肝臟腫大明顯,其上布滿大小均勻、針頭大的膿腫,其中腎臟皮質(zhì)部病變最為明顯。此外,脾臟腫大,肺萎縮,整個腸道明顯臌氣,腹腔內(nèi)有酵母味的滲出液。對照組兔均無異樣。
2.5 藥敏試驗
經(jīng)對氟康唑、酮康唑、伊曲菌素、制霉菌素、二性霉素B、克霉唑等動物常用抗真菌藥在沙氏瓊脂培養(yǎng)平皿上,對該菌進行藥物敏感性試驗。結(jié)果表明,該菌對伊曲菌素、制霉菌素高敏;氟康唑、二性霉素B中敏;克霉唑、酮康唑低敏;常用抗生素基本無作用。
3 診斷
經(jīng)實驗室分離鑒定,結(jié)合臨床癥狀、實驗動物剖檢變化及藥敏試驗分析,綜合診斷本病例中有白色念珠菌感染。
4 小結(jié)
白色念珠菌作為條件性致病菌,多屬內(nèi)源性感染。長期大量使用廣譜抗生素,加之不良的環(huán)境衛(wèi)生,導(dǎo)致畜禽機體正常菌群平衡失調(diào),成為發(fā)病因素之一。在生產(chǎn)工作中,只要加強管理,搞好環(huán)境衛(wèi)生,科學(xué)喂養(yǎng),均可避免本病伴發(fā)。鹿混合感染白色念珠菌已初見端倪,應(yīng)該引起廣大鹿養(yǎng)殖場工作人員的重視。
1 發(fā)病情況及病料采集
長春市某鹿場,約6.1%(8/131)發(fā)生程度不同的腹瀉,經(jīng)本場獸醫(yī)臨床指導(dǎo)用藥(氟苯尼考注射劑+退熱神針+復(fù)合維生素)部分好轉(zhuǎn)并痊愈,剩余3只頑固性腹瀉不止,患鹿精神沉郁,被毛凌亂,瘦弱,明顯營養(yǎng)不良。體溫40~41.5℃。肛門周圍污穢,糞便呈豆腐渣樣,內(nèi)含小氣泡。棉拭子取肛門污物及糞便。
2 實驗室檢查
2.1 涂片染色鏡檢
將病料經(jīng)生理鹽水處理后革蘭氏染色后鏡檢??梢姶蟛糠譃楦锾m氏染色陽性,著色不均勻,具有成群的芽生孢子和假菌絲,出芽細胞卵圓形,似酵母細胞樣。還有少量革蘭氏陰性菌,紅色短小桿狀。
2.2 病原分離培養(yǎng)
將病料經(jīng)生理鹽水處理后,直接劃線接種于沙氏瓊脂培養(yǎng)基平板、玉米粉吐溫瓊脂培養(yǎng)基平板及BTB平板上進行培養(yǎng)。然后根據(jù)菌落形態(tài)不同挑單菌落純化,結(jié)果在沙氏瓊脂培養(yǎng)基上,經(jīng)37℃培養(yǎng)48h的菌落為奶油,色酵母樣,圓形、邊緣整齊、中央凸起,濕潤、光滑。取該菌落中的培養(yǎng)物經(jīng)革蘭氏染色鏡檢,可見有成群的芽生孢子及假菌絲。在玉米粉吐溫瓊脂培養(yǎng)上經(jīng)37℃培養(yǎng)48h后,挑取菌落經(jīng)革蘭氏染色鏡檢,可見真菌絲、假菌絲、芽生孢子。在BTB培養(yǎng)基上,發(fā)酵葡萄糖后使綠色平板變成黃色,形成圓形、邊緣整齊的小菌落。
2.3 生化試驗
將經(jīng)過在沙氏瓊脂培養(yǎng)基平板及玉米粉吐溫瓊脂培養(yǎng)基平板純培養(yǎng)的菌液,用接種環(huán)接種于葡萄糖、麥芽糖、乳糖、半乳糖、蔗糖、果糖,甘露醇、山梨醇,經(jīng)37℃培養(yǎng)24h。結(jié)果顯示,該菌可利用葡萄糖、麥芽糖、果糖,產(chǎn)酸產(chǎn)氣,利用蔗糖、半乳糖,產(chǎn)酸不產(chǎn)氣,不利用乳糖、甘露醇、山梨醇。在BTB培養(yǎng)基.卜生長的小菌落未做生化試驗。
2.4 動物試驗
取小鼠4只,分成兩組,實驗組2只,將24h內(nèi)培養(yǎng)的菌液進行頸部皮下接種,對照組2只腹腔注射生理鹽水。實驗鼠在3h后接種部位有炎癥反應(yīng);5h后接種部位出現(xiàn)紅腫;7h后紅腫明顯加重。試驗鼠精神沉郁,伴有輕度腹瀉。對照鼠無異常反應(yīng)。第5天將兔致死。剖開膿腫部位,可見膿腫液粘稠狀。取膿腫液涂片經(jīng)革蘭氏染色鏡檢后觀察,發(fā)現(xiàn)病原形態(tài)同前。剖檢死兔,可見腎臟和肝臟腫大明顯,其上布滿大小均勻、針頭大的膿腫,其中腎臟皮質(zhì)部病變最為明顯。此外,脾臟腫大,肺萎縮,整個腸道明顯臌氣,腹腔內(nèi)有酵母味的滲出液。對照組兔均無異樣。
2.5 藥敏試驗
經(jīng)對氟康唑、酮康唑、伊曲菌素、制霉菌素、二性霉素B、克霉唑等動物常用抗真菌藥在沙氏瓊脂培養(yǎng)平皿上,對該菌進行藥物敏感性試驗。結(jié)果表明,該菌對伊曲菌素、制霉菌素高敏;氟康唑、二性霉素B中敏;克霉唑、酮康唑低敏;常用抗生素基本無作用。
3 診斷
經(jīng)實驗室分離鑒定,結(jié)合臨床癥狀、實驗動物剖檢變化及藥敏試驗分析,綜合診斷本病例中有白色念珠菌感染。
4 小結(jié)
白色念珠菌作為條件性致病菌,多屬內(nèi)源性感染。長期大量使用廣譜抗生素,加之不良的環(huán)境衛(wèi)生,導(dǎo)致畜禽機體正常菌群平衡失調(diào),成為發(fā)病因素之一。在生產(chǎn)工作中,只要加強管理,搞好環(huán)境衛(wèi)生,科學(xué)喂養(yǎng),均可避免本病伴發(fā)。鹿混合感染白色念珠菌已初見端倪,應(yīng)該引起廣大鹿養(yǎng)殖場工作人員的重視。