近年來，我國香菇生產發(fā)展迅速，尤其以代料栽培香菇較為突出。傳統(tǒng)的香菇固體制種技術經過較為繁鎖的母種、原種、栽培種的三級培育，最后才能擴大到栽培袋的生產。其勞動強度之大、工藝之繁鎖、雜菌污染率之高、生長周期之長等都大大制約了香菇的發(fā)展。本實驗以6個香菇菌株的液體菌種進行培養(yǎng)和栽培對比，為香菇液體菌種的推廣應用提供一定的理論依據。
1 材料與方法
1.1 供試菌株 L135（華中農業(yè)大學）、L939（華中農業(yè)大學）、L241-4（信陽農專食用菌實驗室）、L103（西峽縣農豐菌業(yè)公司）、L9608（河南省農科院）、L9015（河南省科學院生物研究所）。
1.2 培養(yǎng)基配方 ①液體培養(yǎng)基（CYM）：蛋白胨2g，酵母膏2g，硫酸鎂0.5g，磷酸二氫鉀0.46g，磷酸氫二鉀1.0g，葡萄糖20g，瓊脂20g，蒸餾水1000mL。②栽培培養(yǎng)基：木屑77%，麩皮10%，米糠10%，蔗糖0.7%，磷酸二氫鉀0.3%，石膏1%，生石灰1%。含水量55%～60%。
1.3 液體菌種培養(yǎng)方法 將不同的香菇菌株分別接入斜面培養(yǎng)基，在（25±1）℃的條件下培養(yǎng)9d，待菌絲長滿斜面后，再分別轉入液體培養(yǎng)基內，每瓶接種量為0.5平方厘米菌絲3塊，每個處理（配方）重復3瓶。25℃靜止培養(yǎng)48h、然后在轉速為120r/min、溫度為（25±1）℃的條件下振蕩培養(yǎng)6d，瓶內產生許多細小而稠密的菌絲球時終止培養(yǎng)。
1.4 液體菌種菌絲體的營養(yǎng)成分測定 六個香菇菌株接入液體培養(yǎng)基內，每瓶100mL培養(yǎng)液接0.5平方厘米菌絲塊，重復5瓶，終止培養(yǎng)后，將發(fā)酵成熟的培養(yǎng)液用60目篩過濾，收集各菌株的菌絲體和濾液，菌絲體用蒸餾水清洗2次，60℃烘干至恒重，用電子天平稱菌絲體干重計算生物量。pH值用精密 pH試紙測定。
1.5 液體菌種培養(yǎng)特性比較 本試驗采用栽培袋的規(guī)格為 55cm×15cm×0.045cm，每袋裝干料1.5kg，接種后置低溫20～25℃條件培養(yǎng)，每品種20袋。菌絲開始萌發(fā)時，用直尺測量菌絲生長速度。菌絲滿袋后移入菇房脫袋出菇，并對出菇特性進行對比。
2 結果與分析
2.1 不同香菇菌株液體菌種菌絲體生物量和菌液pH值測定
將6個香菇菌株接入同一配方的液體培養(yǎng)基內，每瓶裝100mL培養(yǎng)液，每個處理重復5次，培養(yǎng)結束后，測定不同香菇菌株之間菌絲體的干重和初、終pH，其結果見表1。
表1 不同香菇菌株之間生物量（mg/mL）及pH
品種 菌絲干重 初始pH 終止pH pH值變化值
L9608 16.7 6 4.2 1.8
L241-4 16.4 6 4.2 1.8
L939 9.7 6 3.9 2.1
L135 9.9 6 3.9 2.1
L9015 8.9 6 4.2 1.8
L103 7.8 6 3.9 2.1
從表1可見，6個香菇菌株的菌絲干重以L9608和L241-4較高。結果說明這兩個菌株在液體培養(yǎng)基中，對各種營養(yǎng)物質分解利用較快，利于菌絲吸收、生長和活力的提高，適宜液體培養(yǎng)。而其他4個菌株菌絲干重較低，說明該菌株不適宜液體培養(yǎng)。6個香菇菌株的pH值變化范圍不大。
2.2 不同菌株菌絲在料袋內生長情況 將6個香菇菌株的液體菌種接種在相同配方的栽培料上，采用大小相同規(guī)格的栽培袋，每袋裝料相同，接種后置20～25℃條件下培養(yǎng)，以10d為區(qū)間，用直尺測定每袋菌絲生長速度，并計算平均值。其菌絲生長情況，結果見表2。
表2 不同菌株在菌袋內菌絲生長情況 （mm）
菌絲生長 L9608 L9015 L103 L939 L241-4 L135
菌絲長速 32.19 28.72 27.14 29.32 32.30 31.28
36.87 27.63 28.32 28.26 37.43 29.33
31.64 35.28 29.24 34.34 30.30 27.29
平均值 33.57 30.55 28.23 30.64 33.34 29.30
注：以上為10日測定值。
從表2可見，6個香菇菌株在應用于栽培時，L103、L135、L939、L9015四個菌株抵抗力相對較弱，菌絲生長慢。L9608、 L241-4菌絲生長速度相對較快，污染相對較低。L9608菌絲生長最快，10日均值為33.57mm，L103菌絲生長最慢，說明各菌株菌絲生活力有一定差異。
2.3 不同菌株出菇情況 各菌株栽培試驗結果見表3。
表3 不同菌株的出菇特征 （單位：g、%）
菌株 出菇早晚 出菇特性 菇蓋大小 柄長 子實體顏色 總產量 生物效率 位次
L241-4 中 單 中-大 中 黃褐色 23952 79.42 2
L9608 中 單 中 短 淺褐色 23955 79.83 1
L939 中 單 中 短 褐色 20601 68.67 1
L135 早 單/叢 中 中 茶褐色 20958 69.86 4
L9015 中早 單/叢 小 短 淺褐色 21426 71.42 3
L103 早 單 大 小短 褐色 19725 65.76 6
平均值 21769 72.33
從表3可以看出6個香菇菌株中L241-4、L939、L9608出菇晚，屬晚熟型菌株。產量最高為L9608，其次為L241-4；生物學效率，L9608＞L241-4＞L9015＞L135＞L939＞L103。
3 討 論
本試驗通過對6個香菇菌株的液體菌種栽培特性進行分析，可看出，6個菌株中以L9608、L241-4兩個菌株菌絲活力、生長勢以及抗雜力等方面具有一定優(yōu)勢，適宜于液體菌種代料栽培。對于同一菌株在不同溫度等生態(tài)因子條件下的培養(yǎng)特性和出菇特性及其產量的對比還需進一步試驗。
注：在實驗過程中得到華中農業(yè)大學呂作舟教授的大力支持，深表謝意。
1 材料與方法
1.1 供試菌株 L135（華中農業(yè)大學）、L939（華中農業(yè)大學）、L241-4（信陽農專食用菌實驗室）、L103（西峽縣農豐菌業(yè)公司）、L9608（河南省農科院）、L9015（河南省科學院生物研究所）。
1.2 培養(yǎng)基配方 ①液體培養(yǎng)基（CYM）：蛋白胨2g，酵母膏2g，硫酸鎂0.5g，磷酸二氫鉀0.46g，磷酸氫二鉀1.0g，葡萄糖20g，瓊脂20g，蒸餾水1000mL。②栽培培養(yǎng)基：木屑77%，麩皮10%，米糠10%，蔗糖0.7%，磷酸二氫鉀0.3%，石膏1%，生石灰1%。含水量55%～60%。
1.3 液體菌種培養(yǎng)方法 將不同的香菇菌株分別接入斜面培養(yǎng)基，在（25±1）℃的條件下培養(yǎng)9d，待菌絲長滿斜面后，再分別轉入液體培養(yǎng)基內，每瓶接種量為0.5平方厘米菌絲3塊，每個處理（配方）重復3瓶。25℃靜止培養(yǎng)48h、然后在轉速為120r/min、溫度為（25±1）℃的條件下振蕩培養(yǎng)6d，瓶內產生許多細小而稠密的菌絲球時終止培養(yǎng)。
1.4 液體菌種菌絲體的營養(yǎng)成分測定 六個香菇菌株接入液體培養(yǎng)基內，每瓶100mL培養(yǎng)液接0.5平方厘米菌絲塊，重復5瓶，終止培養(yǎng)后，將發(fā)酵成熟的培養(yǎng)液用60目篩過濾，收集各菌株的菌絲體和濾液，菌絲體用蒸餾水清洗2次，60℃烘干至恒重，用電子天平稱菌絲體干重計算生物量。pH值用精密 pH試紙測定。
1.5 液體菌種培養(yǎng)特性比較 本試驗采用栽培袋的規(guī)格為 55cm×15cm×0.045cm，每袋裝干料1.5kg，接種后置低溫20～25℃條件培養(yǎng)，每品種20袋。菌絲開始萌發(fā)時，用直尺測量菌絲生長速度。菌絲滿袋后移入菇房脫袋出菇，并對出菇特性進行對比。
2 結果與分析
2.1 不同香菇菌株液體菌種菌絲體生物量和菌液pH值測定
將6個香菇菌株接入同一配方的液體培養(yǎng)基內，每瓶裝100mL培養(yǎng)液，每個處理重復5次，培養(yǎng)結束后，測定不同香菇菌株之間菌絲體的干重和初、終pH，其結果見表1。
表1 不同香菇菌株之間生物量（mg/mL）及pH
品種 菌絲干重 初始pH 終止pH pH值變化值
L9608 16.7 6 4.2 1.8
L241-4 16.4 6 4.2 1.8
L939 9.7 6 3.9 2.1
L135 9.9 6 3.9 2.1
L9015 8.9 6 4.2 1.8
L103 7.8 6 3.9 2.1
從表1可見，6個香菇菌株的菌絲干重以L9608和L241-4較高。結果說明這兩個菌株在液體培養(yǎng)基中，對各種營養(yǎng)物質分解利用較快，利于菌絲吸收、生長和活力的提高，適宜液體培養(yǎng)。而其他4個菌株菌絲干重較低，說明該菌株不適宜液體培養(yǎng)。6個香菇菌株的pH值變化范圍不大。
2.2 不同菌株菌絲在料袋內生長情況 將6個香菇菌株的液體菌種接種在相同配方的栽培料上，采用大小相同規(guī)格的栽培袋，每袋裝料相同，接種后置20～25℃條件下培養(yǎng)，以10d為區(qū)間，用直尺測定每袋菌絲生長速度，并計算平均值。其菌絲生長情況，結果見表2。
表2 不同菌株在菌袋內菌絲生長情況 （mm）
菌絲生長 L9608 L9015 L103 L939 L241-4 L135
菌絲長速 32.19 28.72 27.14 29.32 32.30 31.28
36.87 27.63 28.32 28.26 37.43 29.33
31.64 35.28 29.24 34.34 30.30 27.29
平均值 33.57 30.55 28.23 30.64 33.34 29.30
注：以上為10日測定值。
從表2可見，6個香菇菌株在應用于栽培時，L103、L135、L939、L9015四個菌株抵抗力相對較弱，菌絲生長慢。L9608、 L241-4菌絲生長速度相對較快，污染相對較低。L9608菌絲生長最快，10日均值為33.57mm，L103菌絲生長最慢，說明各菌株菌絲生活力有一定差異。
2.3 不同菌株出菇情況 各菌株栽培試驗結果見表3。
表3 不同菌株的出菇特征 （單位：g、%）
菌株 出菇早晚 出菇特性 菇蓋大小 柄長 子實體顏色 總產量 生物效率 位次
L241-4 中 單 中-大 中 黃褐色 23952 79.42 2
L9608 中 單 中 短 淺褐色 23955 79.83 1
L939 中 單 中 短 褐色 20601 68.67 1
L135 早 單/叢 中 中 茶褐色 20958 69.86 4
L9015 中早 單/叢 小 短 淺褐色 21426 71.42 3
L103 早 單 大 小短 褐色 19725 65.76 6
平均值 21769 72.33
從表3可以看出6個香菇菌株中L241-4、L939、L9608出菇晚，屬晚熟型菌株。產量最高為L9608，其次為L241-4；生物學效率，L9608＞L241-4＞L9015＞L135＞L939＞L103。
3 討 論
本試驗通過對6個香菇菌株的液體菌種栽培特性進行分析，可看出，6個菌株中以L9608、L241-4兩個菌株菌絲活力、生長勢以及抗雜力等方面具有一定優(yōu)勢，適宜于液體菌種代料栽培。對于同一菌株在不同溫度等生態(tài)因子條件下的培養(yǎng)特性和出菇特性及其產量的對比還需進一步試驗。
注：在實驗過程中得到華中農業(yè)大學呂作舟教授的大力支持，深表謝意。
