這是一種無性繁殖方法，分離技術(shù)較為簡(jiǎn)單，采用子實(shí)體的菌肉組織進(jìn)行分離培養(yǎng)，也是獲得純菌種最常用的方法?？蛇x用PSA或PDA等斜面培養(yǎng)基，而且所用的培養(yǎng)基必須保持斜面上無多余的游離冷凝水。分離的“種茹”要求：選擇生長(zhǎng)良好、朵形圓整、無雜菌污染和蟲害的子實(shí)體。若菌蓋表面有雜物，需用75%的酒精進(jìn)行消毒。在無菌條件下，用手把茹掰成兩半，再用火焰滅菌過的接種針鉤取干凈的小塊菌肉，迅速拉入滅過菌的斜面培養(yǎng)基上，抽出接種針，塞上棉塞。一般要求分離多次多支試管，以便進(jìn)行選擇。因金針茹是蓋小而肉薄的食用菌，也可采用特殊的髓部分離法進(jìn)行組織分離，即左手抓住菌柄，右手持長(zhǎng)柄鑷子沿著茹柄方向去掉菌蓋，這時(shí)菌柄的頂端露出弧形的生長(zhǎng)點(diǎn)，用接種針鉤取生長(zhǎng)點(diǎn)的組織塊移入斜面培養(yǎng)基中。之后，把已經(jīng)分離好的試管放在適溫(20~25℃)的條件下培養(yǎng)，大約經(jīng)過36h左右，在組織塊周圍長(zhǎng)出白色放射狀的菌絲，10d左右即長(zhǎng)滿試管。挑選沒有污染雜菌的試管，把金針茹的菌絲體接入新的試管培養(yǎng)基上純化培養(yǎng)即為野生金針茹純菌種。
