表一、圖一、圖二和圖三為已報(bào)道的豬場(chǎng)臨床分離的致病大腸桿菌和鏈球菌的耐藥情況,均表現(xiàn)為嚴(yán)重的耐藥性和多重耐藥性,絕大多數(shù)菌株同時(shí)對(duì)十多種的抗生素具有耐藥性。即便就是從臨床健康豬也可以分離出鏈球菌,并且檢出率高,同時(shí)檢測(cè)株對(duì)臨床使用頻率較高的抗生素耐藥情況嚴(yán)重,主要有四環(huán)素、大環(huán)內(nèi)酯類、頭孢菌素類、喹諾酮類以及磺胺類抗生素,并且出現(xiàn)了大量多重耐藥株。
在此背景下,我國從保護(hù)養(yǎng)殖業(yè)持續(xù)發(fā)展和人民健康安全的角度出發(fā),啟動(dòng)了動(dòng)物源細(xì)菌耐藥性監(jiān)測(cè)項(xiàng)目,對(duì)同一養(yǎng)殖場(chǎng)對(duì)不同飼養(yǎng)階段的動(dòng)物定期分別采樣;主要采集泄殖腔拭子或動(dòng)物組織,用以分離大腸桿菌、沙門氏菌、金葡菌、空腸彎曲菌等,測(cè)定這些菌株的MIC(最小抑菌濃度),來評(píng)價(jià)該養(yǎng)殖場(chǎng)的耐藥性流行情況,為合理用藥提供理論基礎(chǔ),為全國性耐藥性的監(jiān)測(cè)提供可靠數(shù)據(jù)和資料。
與耐藥菌抗?fàn)幈仨氄莆兆£P(guān)鍵性“武器”---藥敏實(shí)驗(yàn),因此豬病的診斷現(xiàn)在正在從臨床解剖走向?qū)嶒?yàn)室檢測(cè)。監(jiān)測(cè)臨床常見細(xì)菌的耐藥性現(xiàn)狀、預(yù)測(cè)細(xì)菌耐藥性變遷,以采取合理有效的措施,遏制細(xì)菌耐藥性的蔓延;根據(jù)細(xì)菌耐藥性監(jiān)測(cè)數(shù)據(jù),制定合理使用抗菌藥物的指導(dǎo)原則,規(guī)范臨床抗感染治療;這些已成為保護(hù)人畜健康的當(dāng)務(wù)之急。細(xì)菌耐藥性監(jiān)測(cè)的主要意義在于:(1)了解致病菌的耐藥機(jī)制以正確選用抗菌藥;(2)了解當(dāng)?shù)刂虏【退帣C(jī)制的發(fā)展趨勢(shì),以制訂區(qū)域性的抗菌藥物使用指南;(3)了解細(xì)菌耐藥性的發(fā)生原因,以阻止耐藥性的發(fā)展。
目前最為普遍的藥敏實(shí)驗(yàn)方法為紙片擴(kuò)散法和MIC測(cè)定。其中紙片法擴(kuò)散法是最適合常規(guī)實(shí)驗(yàn)室使用。其特點(diǎn)是方便、易操作,測(cè)定的藥物隨意可變,靈活性強(qiáng)。重要的是紙片法藥敏試驗(yàn)有一套完善的質(zhì)量控制方法,結(jié)果相當(dāng)可靠。紙片法唯一的不足是中度耐藥的菌株會(huì)出現(xiàn)問題。而MIC測(cè)定是把抗菌藥物倍比稀釋在肉湯或瓊脂中定量測(cè)定MIC的方法。稀釋法可以精確測(cè)定一些厭氧菌及苛養(yǎng)菌(對(duì)生長環(huán)境、營養(yǎng)要求較苛刻的細(xì)菌),而對(duì)這些菌,紙片擴(kuò)散法是無能為力的。瓊脂稀釋法較肉湯稀釋法精確的原因在于細(xì)菌的生長情況可查,且一套平皿可測(cè)多株細(xì)菌,這兩種方法的缺點(diǎn)都耗時(shí)費(fèi)力。對(duì)于藥敏實(shí)驗(yàn)結(jié)果的判定分為以下三個(gè)標(biāo)準(zhǔn):
敏感 (Susceptibillity, S):表明該菌株所致感染可以用推薦的抗菌藥物劑量進(jìn)行治療,除非存在禁忌癥。
中等(Intermediate, I):用抗菌藥物MIC濃度治療菌株感染,可使血液和組織中藥物濃度接近通??蛇_(dá)到的水平,而抗生素治療的反應(yīng)率可能低于敏感株。意味著藥物生理濃度部位具有臨床效力(如尿液中的喹諾酮類和β-內(nèi)酰胺類)或可用高于正常劑量的藥物進(jìn)行治療(β-內(nèi)酰胺類)。該類還包括一個(gè)緩沖區(qū),可防止微小的,未能控制的技術(shù)因素造成的結(jié)果解釋錯(cuò)誤,特別是對(duì)那些安全范圍窄的藥物。
耐藥(Resistance, R):指按常規(guī)劑量使用,抗生素通常達(dá)到的全身濃度不能抑制其生長的菌株,和/或某些抗菌藥物的抑菌圈直徑在耐藥機(jī)制范圍,且臨床治療效果不可靠。
通過測(cè)定病原菌的敏感性,可以做到抗生素的合理使用,有效控制疫病;并且避免抗藥菌株的出現(xiàn),減少養(yǎng)殖成本;為耐藥性監(jiān)測(cè)及流行病學(xué)調(diào)查提供臨床可靠的資料。因此如果不做病原分離和藥敏實(shí)驗(yàn),將會(huì)出現(xiàn)以下結(jié)果:1)治療過度,用藥不當(dāng),過度使用抗生素;2)治療錯(cuò)誤----用藥錯(cuò)誤,延誤治療效果;3)增加細(xì)菌的耐藥性的出現(xiàn);4)增加生產(chǎn)成本和治療費(fèi)用;5)影響食品安全,危及人類健康。
在獸醫(yī)臨床使用抗生素預(yù)防和治療疾病過程中,還要做的聯(lián)合使用、輪換使用和有計(jì)劃的階段性使用抗生素??股卣_和合理的使用將會(huì)提高治療和預(yù)防效果、減少細(xì)菌耐藥性產(chǎn)生、降低成本。如果不合理的使用將使菌群失調(diào),二重感染、導(dǎo)致細(xì)菌發(fā)展多重耐藥、病情或疫情惡化、增加治療成本等等。
綜述可見,我們不僅要對(duì)病豬病料進(jìn)行病原分離和藥敏實(shí)驗(yàn),還要定期對(duì)臨床健康豬群的致病菌攜帶情況進(jìn)行調(diào)查和病原分離,掌握它們對(duì)各種抗生素的耐藥情況,為更好地監(jiān)控病原菌耐藥性、防治細(xì)菌病以及有效防控細(xì)菌性傳染病的暴發(fā)具有重要價(jià)值。
目前,回盛生物科技有限公司擁有獸醫(yī)檢測(cè)實(shí)驗(yàn)室,具備病原分離和耐藥性監(jiān)測(cè)的儀器設(shè)備和人員,特面向廣大養(yǎng)殖戶提供豬源病原菌的分離以及耐藥性檢測(cè)服務(wù),為廣大養(yǎng)殖戶養(yǎng)好豬保駕護(hù)航。
表1 來源于郭瀟木,中國畜牧獸醫(yī), 2014, (01): 182-186
圖1來源于郭瀟木,中國畜牧獸醫(yī), 2014,(01): 182-186
圖2 來源于黃文明,中國畜牧獸醫(yī), 2013, (05): 54-58
圖3來源于黃文明,中國畜牧獸醫(yī), 2013, (05): 54-58