白小青 尹靖東

    （西北農(nóng)林科技大學(xué) 中國 楊凌 712100）

    摘要：本文旨在用趾骨灰分含量評價六種含磷礦物質(zhì)飼料的生物學(xué)效價(BV)，并就飼料的種類和日糧非植酸磷（NPP）的水平兩方面，探討仔雞對磷的利用率。本試驗以玉米?豆粕型日糧為基礎(chǔ)日糧，以A（圓粒型磷酸氫鈣和磷酸二氫鈣混合物）、B（粒狀磷酸氫鈣和磷酸二氫鈣混合物）、C（粉狀磷酸氫鈣）、D（粒狀磷酸氫鈣）、E和F（兩種國外產(chǎn)含磷礦物質(zhì)飼料）為參試物，選用１４４０只新生蛋用仔公雞，隨機(jī)分為18個處理，每個處理內(nèi)5個重復(fù)，隨機(jī)給飼由六種參試物、分別配成日糧NPP水平各自為0.27%、0.32%、0.37%的18種試驗日糧，試驗日糧除總磷（TP）和非植酸磷（NPP）水平外，其他各項指標(biāo)均與基礎(chǔ)日糧保持一致。試驗結(jié)果表明：在日糧非植酸磷水平為０.２７％～０.３７％時，分別添加Ａ、Ｂ、Ｃ三種飼料的試驗日糧，其ＮＰＰ水平與仔雞趾骨灰分含量呈顯著的直線相關(guān)（Ｐ〈０。０５，Ｐ〈０。０５，Ｐ〈０。０１），計算其回歸方程，并用斜率比法求出三種含磷礦物質(zhì)飼料的相對生物學(xué)效價（RBV）值分別為： 

    Ａ：Y=1.3721+23.0453X，r=0.7768，RBV（XA ）=57.65；

    Ｂ：Y=1.4098+25.3273X，r=0.7516，RBV（XB ）=63.36；

    Ｃ：Y=-3.3696+39.9710X，r=0.9287，RBV（XC ）=100。

    而分別添加Ｄ、Ｅ、Ｆ三種飼料的試驗日糧，其ＮＰＰ水平與仔雞趾骨灰分含量不呈直線相關(guān)（Ｐ）０。０５，Ｐ）０。０５，Ｐ）０。０５）。以趾骨灰分含量為評價指標(biāo)，在日糧ＮＰＰ水平為0.27%時，仔雞對六種含磷礦物質(zhì)飼料的利用無顯著差別（P>0.05）；在0.32%的水平上，仔雞對E利用大于A、B（P<0.05）；在0.37%水平上，仔雞對B利用率大于E、F、D(P<0.01，P<0.01，P<0.05)，對C利用率大于E、F（P<0.05）。

    關(guān)鍵詞：含磷礦物質(zhì)飼料 非植酸磷 生物學(xué)效價 仔雞

    1．前言

    磷是動物體不可缺少的重要礦物質(zhì)常量元素，其營養(yǎng)作用可列為能量和蛋白質(zhì)之后居第三位[1]。動物所需要的磷主要從飼料中獲得，而植物性飼料中磷大部分以植酸磷形式存在，動物對其利用率只有20%--30%[2]。飼料中不足的磷，必須靠含磷礦物質(zhì)飼料來補(bǔ)齊。

    含磷礦物質(zhì)飼料是飼料工業(yè)的重要組成。隨著配合飼料工業(yè)的發(fā)展，對含磷礦物質(zhì)飼料的需要量大大增加。然而，我國磷礦資源相對缺乏[3]。因此，如何正確評定含磷礦物質(zhì)飼料營養(yǎng)價值和合理利用含磷礦物質(zhì)飼料，就具有重大意義：一方面，它能保證動物生產(chǎn)的順利進(jìn)行；另一方面，它可以減少浪費，減輕因磷的大量排放造成的環(huán)境污染。

    生物學(xué)效價（生物利用率，BV）是研究磷在動物體內(nèi)生理過程中作用的測量尺度。含磷礦物質(zhì)飼料中磷的生物學(xué)效價有絕對效價和相對效價兩種表示方法，以第二種應(yīng)用更廣泛。

    含磷礦物質(zhì)飼料的生物學(xué)效價的測定有平衡試驗法和斜率比法。前一種方法因要采用同位素示蹤技術(shù)排除內(nèi)源性磷的損失，所以一般條件下，測定絕對效價即真利用率很困難。而且，所得數(shù)據(jù)又僅僅對該含磷礦物質(zhì)在某一特殊條件下的日糧、環(huán)境和一定年齡、性別及品種的動物才適用[4]。后一種方法測定相對效價，以其靈敏、直觀、準(zhǔn)確而被廣泛應(yīng)用[5]。

    常用測定含磷礦物質(zhì)飼料磷的相對效價的指標(biāo)有體增重、脛骨灰分含量、趾骨灰分含量、骨對體重的比率等。屠焰（1997）指出，用不同指標(biāo)測定的含磷礦物質(zhì)飼料磷的相對效價值有顯著不同，以體增重所測相對效價最高，脛骨灰分含量最低，趾骨灰分含量居中。而且，趾骨灰分同脛骨灰分同樣敏感。同時，測定趾骨灰分較脛骨灰分簡單易行，故可用趾骨灰分替代脛骨灰分[6]。

    含磷礦物質(zhì)飼料的相對效價測定，一般選用仔雞和10--15公斤的仔豬作為實驗動物[7]。據(jù)報道（屠焰1997），相對效價值不受試雞類型（蛋用仔公雞或肉用仔雞）的影響。

    含磷礦物質(zhì)飼料的相對效價受多種因素影響，如飼料的種類、測定指標(biāo)、日糧鈣磷比例、溶解性、顆粒大小、植酸酶的應(yīng)用等。

    本試驗以蛋用仔公雞為試驗動物，以趾骨灰分含量為指標(biāo)評價含磷礦物質(zhì)的生物學(xué)效價，并探討影響生物利用率的因素

    ２．材料與方法

    ２.1試驗飼料

    本試驗的試驗飼料是由參試物（見表１）和基礎(chǔ)日糧（見表２）組成的試驗日糧：分別向基礎(chǔ)日糧中等梯度添加每種參試物，使日糧NPP添加水平依次為0.05%、0.10%、0.15%，從而使每種參試物形成三種試驗日糧，其NPP水平依次達(dá)到0.27%、0.32%、0.37%，共計18種試驗日糧。試驗日糧中除ＴＰ和NPP外，各項指標(biāo)與基礎(chǔ)日糧保持一致。

    2.2試驗動物和設(shè)計方法

    選用同批孵化、健康、體重均勻的新生伊薩褐殼蛋用仔公雞1440只，采用單因子完全隨機(jī)設(shè)計：將1440只試雞隨機(jī)分為18組，分別飼喂18種試驗日糧。每個組內(nèi)5個重復(fù)，每個重復(fù)16只試雞。本試驗的試驗期為21天

    表1 參試物情況描述

    參試物 形狀 鈣（%） 磷（%）

    A 圓粒 19.6 21.3

    B 粒 19.5 21.4

    C 粉 15.3 22.8

    D 粒 15.8 23.1

    E 粉 15.7 20.6

    F 粒 26.8 20.1

     注：A、B是磷酸氫鈣和磷酸二氫鈣（1:2）組成的混合物；C、D是磷酸氫鈣；E、F是國外兩種含磷礦質(zhì)飼料。 

    表2 基礎(chǔ)日糧配方及營養(yǎng)成分

    飼料名稱 添加比例（％） 營養(yǎng)成分 含量

    玉米 65.60 AME 2.85Mcal/kg

    豆粕 31.00 CP 19.1%

    石粉 2.10 Ca 1.00%

    食鹽 0.30 NPP 0.22%

    預(yù)混料 1.00

    合計 100.00

    2.3飼養(yǎng)管理方式

    采取籠養(yǎng)方式，每個重復(fù)一籠，籠的規(guī)格為85×76.5×40cm，底部網(wǎng)眼為1.5×1.5 cm；采用火爐供熱，使一日齡雞舍溫度為34℃，之后每周下降3℃；0--3周齡雞舍濕度保持在65-80%；采用自然光照為主，人工光照為輔，第一周每日光照24小時，之后每日光照23小時，每日早晨7:30--8:30停止光照；采用自然通風(fēng)；試雞在試驗期內(nèi)自由采食、自由飲水；依常規(guī)進(jìn)行雞舍消毒、試雞的免疫防治和其他管理。

    2.４ 測定指標(biāo)

    以試雞的趾骨灰分含量為測定指標(biāo)，具體做法如下：

    于21日齡早晨每重復(fù)組取體重與平均體重接近的4只雞，取其左側(cè)中趾骨，每個重復(fù)組合并為一個樣品，放入塑料袋中，編號、封口、冷凍保存。而后將趾骨用乙醚浸泡96h,脫脂、撈出、放入室溫中晾24h，使其成為風(fēng)干樣品。稱其骨重，然后在200-300℃炭化至無煙，在550℃灰化后稱重，計算灰分含量。

    灰分含量（%）=灰化后灰分量/灰化前骨重×100

    ２.５數(shù)據(jù)處理

    ２.５.1以日糧NPP（%）水平為X,以仔雞趾骨灰分含量（%）為Y，進(jìn)行相關(guān)分析，并進(jìn)行顯著性檢驗。對于檢驗顯著者，建立回歸方程Y=a+bX。以粉狀飼料級磷酸氫鈣為參照物（Xs），設(shè)其回歸方程的斜率為 bs，其它參試物回歸方程的斜率為bt ，則參試物的RBV為：

    ＲBV（Xt）=（bs /bt ）X100

    2.５.2分別就日糧NPP水平和飼料種類兩個方面對雞的趾骨灰分含量進(jìn)行方差分析，并用F檢驗。差異顯著者，再進(jìn)行平均數(shù)多重比較。

    3、結(jié)果與討論

    3.1結(jié)果

    3.1.1以日糧NPP水平為X,以趾骨灰分含量為Y，對Ａ、Ｂ、Ｃ、Ｄ、Ｅ、Ｆ六種含磷礦物質(zhì)飼料分別進(jìn)行相關(guān)分析,其結(jié)果見表3。

    

    表３相關(guān)分析結(jié)果

    飼料種類 A B C D E F

    相關(guān)系數(shù) 0.7768* 0.7516* 0.9287* 0.4443 0.3317 0.2390

    注：相關(guān)系數(shù)值肩標(biāo)上未標(biāo)*者表示用相關(guān)表檢驗不顯著（P>0.05）。

    對于X與Y確成直線相關(guān)的，求出其回歸方程，并用斜率比法求出RBV值： 

    Ａ：Y=1.3721+23.0453X，r=0.7768，RBV（XA ）=57.65；

    Ｂ：Y=1.4098+25.3273X，r=0.7516，RBV（XB ）=63.36；

    Ｃ：Y=-3.3696+39.9710X，r=0.9287，RBV（XC ）=100。

    3.1.2根據(jù)試雞的趾骨灰分含量，就日糧NPP水平和飼料種類兩個方面進(jìn)行方差分析，差異顯著者，進(jìn)行多重比較，結(jié)果見表5和6。

    　　　　　表5 日糧NPP水平對仔雞趾骨灰分含量的影響

    A B C D E F

    0.27% 7.9393b 9.1898b 7.2270b 9.5732 a 9.0512 a 8.8874 a

    0.32% 8.2825b 8.5565b 9.9010a 9.2120 a 10.5420 a 9.7327 a

    0.37% 10.0811a 11.3117a 10.9735a 9.8858 a 9.4650 a 9.4955 a

    注：同列肩標(biāo)相同字母者差異不顯著（P>0.05）。 

    表6 相同NNP水平下各種含磷礦物質(zhì)飼料對仔雞趾骨灰分含量的影響

    0.27% 0.32% 0.37%

    A 7.9393±1.3527 a 8.2825±0.9393 ab 10.0811±1.2639ace

    B 9.1878±1.9544 a 8.5565±1.2527 a 11.3117±0.4314a

    C 7.2270±1.0395 a 9.9010±1.2320 b 10.9736±0.7022ac

    D 9.5732±2.0125 a 9.2120±1.6023 ab 9.8858±1.0221bce

    E 9.0512±1.1437 a 10.5420±0.6283b 9.4650±0.9970e

    F 8.8874±1.5490 a 9.7327±0.8174 ab 9.4955±0.8721be

    注：同列肩標(biāo)相同字母者差異不顯著（P>0.05）。

    3．2. 討論

    3.2.1關(guān)于斜率比法適用條件的討論

    斜率比法是測定含磷礦物質(zhì)飼料磷的相對效價的一種簡單易行的方法（前言中這方面已論述）。但是，它也有一定的局限性：只有經(jīng)過相關(guān)分析后，確成直線相關(guān)，方可使用。本試驗結(jié)果表明：日糧非植酸磷水平在0.27～0.32%時，A、B、C三種飼料Y與X成直線相關(guān)，而D、E、F三種飼料Y與X不成直線相關(guān)。因此，不可使用斜率比法計算其ＲＢＶ值。D、E、F三種飼料Y與X不成直線相關(guān)，究其可能原因有二：一是本試驗的日糧非植酸磷水平（0.27～0.32%）確非其線性范圍；二是試驗所設(shè)水平偏少，數(shù)據(jù)有限，不能完整的估計其線性范圍。至于是一還是二，有待進(jìn)一步研究。

    3.2.2同種磷源不同NNP水平對趾骨灰分（%）的影響

    由表1.3可以看出，每種參試磷源在不同NPP水平下，仔雞的趾骨灰分含量變化不盡一致。其中，D、E、F三種飼料，隨NPP水平上升（由0.27%至0.37%），趾骨灰分含量無明顯差別（P>0.05），而A、B、C三種飼料隨NPP上升（由0.27%至0.37%），仔雞趾骨灰分含量都有上升趨勢（P<0.05）。但是由表1.5可看出，A、B、C的趾骨灰分雖呈上升趨勢，但又有差別：A和B從0.27%升至0.32%，趾骨灰分含量無明顯差別（P>0.05），從0.32%升至0.37%，趾骨灰分含量明顯增大（P<0.05或P<0.01）；C由0.27%上升至0.32%，趾骨灰分明顯增大（P<0.01），由0.32%升至0.37%，趾骨灰分無明顯差別。本試驗飼料C的結(jié)果，與屠焰（1997）以飼料級磷酸氫鈣為參試物確定磷的需要量的試驗中，隨日糧NPP水平上升（0.21%~0.31%，0.31%~0.41%），趾骨灰分含量變化結(jié)果相似。綜合上述，含磷礦物質(zhì)飼料的利用率，并非全部隨日糧NPP水平上升而直線增加。日糧NPP水平影響趾骨灰分含量因飼料種類而異，而且對于有顯著影響的飼料，仔雞的趾骨灰分含量顯著上升的NPP水平區(qū)段不同。因而，在評價某種飼料磷的RBV時，首先要確定測定指標(biāo)與日糧NPP呈直線相關(guān)的線性范圍，而決不能套用其它飼料的線性范圍。

    3.2.3相同NPP水平下各種磷源對趾骨灰分的影響

    由表1.4可看出，在各水平下，各種磷源對趾骨灰分含量的影響不盡一致。在0.27%水平下，六種含磷礦物質(zhì)飼料對趾骨灰分含量無顯著差別。這一結(jié)果與屠焰（1997）以飼料級磷酸氫鈣為參照物評價四種含磷礦物質(zhì)飼料的相對效價的試驗結(jié)果（日糧NPP水平為0.21%時仔雞對四種飼料的利用無差別：趾骨灰分含量都為14.63%）相似。這證明在極低磷水平時，仔雞對各種磷源的利用都很充分，因而各種飼料的效價無差別（P>0.05）。在0.32%水平下，E的利用率顯著高于A（P<0.05）和B（P<0.05）。在0.37%水平下，B的利用率顯著高于E（P<0.01）、F（P<0.01）、D（P<0.05）；與C相比，E、F利用率顯著降低（（P<0.05，P<0.05）。

    由此得出，在相同日糧NPP水平下，仔雞對各種磷源的利用率不一定相同：這一方面受磷源影響，又受水平影響。綜合日糧NPP 0.37%，0.32%水平，可以看出：各種飼料的利用率在兩個水平上大小順序不同，這也證明了磷水平影響磷的利用率。

    4．結(jié)論

    4．1 A、B、C三種飼料，以日糧NPP水平為x,以趾骨灰分含量為y，建立回歸方程和兩者的相關(guān)系數(shù)及飼料的RBV分別為：

    Ａ：Y=1.3721+23.0453X，r=0.7768，RBV（XA ）=57.65；

    Ｂ：Y=1.4098+25.3273X，r=0.7516，RBV（XB ）=63.36；

    Ｃ：Y=-3.3696+39.9710X，r=0.9287，RBV（XC ）=100。

    4．2 對于同一測定指標(biāo)而言，不同含磷礦物質(zhì)飼料其日糧NPP水平與測定指標(biāo)的線性范圍可能不同。因此，針對不同磷源選定同一指標(biāo)測定其RBV，首先要確定磷的需要量，找出線性范圍。

    4．3評定磷源的生物學(xué)效價，只有在略低于或接近于需要量時，測定的RBV值才更為準(zhǔn)確，太低時磷的利用率可能無差別。

    由于試驗條件的限制，本試驗所設(shè)的磷水平偏少，對趾骨灰分含量變化研究不近完善，有待進(jìn)一步研究。

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